Xác định hàm lượng axit oxalic trong trái cây và rau quả bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)
1. Nguyên lý và phương pháp thí nghiệm
Axit oxalic là một loại axit hữu cơ phổ biến trong trái cây và rau quả, có ảnh hưởng trực tiếp đến hương vị và giá trị dinh dưỡng của thực phẩm. Thí nghiệm này sử dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao pha đảo (RP-HPLC). Dưới điều kiện pha động có tính axit, axit oxalic được tách biệt hoàn toàn khỏi các chất gây nhiễu bằng cột sắc ký C18. Đầu dò tia cực tím được đặt ở bước sóng 210 nm được sử dụng để phân tích định lượng, dựa trên đặc tính hấp thụ tia cực tím của các nhóm carboxyl trong phân tử axit oxalic.
2. Đường cong chuẩn và chuẩn bị mẫu
Phương pháp pha loãng theo thang bậc được sử dụng để chuẩn bị các dung dịch chuẩn: cân chính xác 25,0 mg axit oxalic dihydrat và pha loãng đến 25 mL bằng nước siêu tinh khiết để thu được dung dịch gốc 1 mg/mL. Dung dịch này được pha loãng tuần tự thành một loạt các dung dịch chuẩn ở các nồng độ 50, 100, 200, 400 và 800 µg/mL, mỗi nồng độ được tiêm lặp lại ba lần.
Để chuẩn bị mẫu, phương pháp chiết xuất hỗ trợ bằng vi sóng được sử dụng: cân 5,00 g hỗn hợp rau quả, thêm 10 mL dung dịch axit clohydric 0,1 mol/L, xử lý ở 60°C bằng vi sóng trong 10 phút, lọc qua màng lọc 0,45 µm và thu thập dịch lọc để thử nghiệm.
3. Tối ưu hóa các điều kiện sắc ký
Pha động là hệ dung dịch đệm kali dihydro photphat 0,01 mol/L (pH 2,5) – acetonitrile (95:5), với tốc độ dòng chảy 0,8 mL/min và nhiệt độ cột 35°C. Điều chỉnh tỷ lệ acetonitrile cho thấy khi pha hữu cơ vượt quá 10%, thời gian lưu của axit oxalic rút ngắn xuống dưới 3 phút, nhưng xuất hiện hiện tượng kéo dài đuôi đỉnh. Ở điều kiện tối ưu cuối cùng, thời gian lưu của axit oxalic là 4,2 phút, đạt được sự tách biệt hoàn toàn với axit citric và axit malic liền kề (độ phân giải > 1,5).
4. Thẩm định phương pháp
Kiểm định phạm vi tuyến tính cho thấy mối quan hệ tuyến tính tốt giữa diện tích đỉnh và nồng độ trong khoảng 10–1000 µg/mL (R² = 0,9993). Giới hạn phát hiện (LOD), được xác định bằng phương pháp tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu, là 0,5 µg/mL. Trong các thử nghiệm độ lặp lại, độ lệch chuẩn tương đối (RSD) cho sáu lần xác định lặp lại cùng một mẫu rau bina là 1,8%. Các thí nghiệm thu hồi mẫu thêm vào ở ba mức (80%, 100% và 120%) cho tỷ lệ thu hồi trung bình lần lượt là 98,2%, 102,4% và 97,8%, đáp ứng các yêu cầu cho phân tích định lượng.
5. Phân tích mẫu thực tế
Sáu loại trái cây và rau quả có bán trên thị trường đã được thử nghiệm: rau bina (356 ± 12 mg/100 g), cần tây (215 ± 9 mg/100 g), cà chua (18 ± 2 mg/100 g), táo (6 ± 1 mg/100 g), chuối (không phát hiện) và bông cải xanh (89 ± 5 mg/100 g). So sánh với phương pháp tiêu chuẩn quốc gia (GB 5009.277-2016) cho thấy độ lệch tương đối giữa hai phương pháp nhỏ hơn 5%, chứng minh độ tin cậy của phương pháp này. Đặc biệt, phương pháp HPLC thể hiện độ nhạy cao hơn so với các phương pháp chuẩn độ truyền thống khi phân tích các mẫu có hàm lượng thấp.
6. Những ghi chú quan trọng
Kiểm soát chặt chẽ giá trị pH trong quá trình xử lý mẫu. Nếu pH của dịch chiết vượt quá 3, sự kết tủa canxi oxalat sẽ dẫn đến kết quả thử nghiệm thấp. Pha động nên được pha mới mỗi ngày để tránh kết tủa muối và tắc nghẽn cột. Sau mỗi 20 lần tiêm mẫu, hãy rửa cột bằng hỗn hợp acetonitrile–nước (30:70) trong 30 phút để ngăn ngừa sự suy giảm hiệu quả của cột. Đối với các mẫu có chứa sắc tố (ví dụ: bắp cải tím), nên thêm bước tinh chế bằng phương pháp chiết pha rắn trước khi tiêm mẫu.
7. Hướng ứng dụng và mở rộng
Phương pháp này có thể được mở rộng để phát hiện axit oxalic trong các mẫu sinh học như nước tiểu và máu. Bằng cách điều chỉnh thành phần pha động (ví dụ: thêm tetrabutylammonium hydroxide), axit oxalic và các chất chuyển hóa của nó có thể được xác định đồng thời. Kết hợp với đầu dò khối phổ, một phương pháp phát hiện vết chính xác hơn có thể được thiết lập. Trong ngành công nghiệp chế biến thực phẩm, phương pháp này có thể cung cấp dữ liệu hỗ trợ quan trọng cho việc lựa chọn các giống có hàm lượng axit oxalic thấp và tối ưu hóa quy trình nấu nướng.
Công ty TNHH Hóa chất Zibo Anhao – Axit oxalic
Công ty TNHH Hóa chất Zibo Anhao là nhà cung cấp và xuất khẩu đáng tin cậy axit oxalic chất lượng cao (cấp công nghiệp, tối thiểu 99,6%) từ Sơn Đông, Trung Quốc. Axit oxalic của chúng tôi là chất rắn kết tinh màu trắng, còn được gọi là axit ethanedioic, với công thức phân tử C₂H₂O₄. Sản phẩm có độ tinh khiết cao, ít tạp chất và chất lượng ổn định giữa các lô hàng, đáp ứng nhu cầu của các ngành công nghiệp dệt may, da thuộc, luyện kim, chế biến đất hiếm, làm sạch hóa học và xây dựng.
Chúng tôi cung cấp cả axit oxalic khan và axit oxalic ngậm nước, có sẵn trong các bao 25kg, 50kg và bao lớn 1000kg. Với quy trình kiểm soát chất lượng nghiêm ngặt, báo cáo kiểm nghiệm đầy đủ và kế hoạch cung ứng linh hoạt, chúng tôi đảm bảo cung cấp ổn định và hiệu suất nhất quán cho người mua trên toàn cầu. Sản phẩm của chúng tôi đã được xuất khẩu rộng rãi sang Đông Nam Á, Châu Âu, Châu Phi và Châu Mỹ, được công nhận về chất lượng đáng tin cậy và giá cả cạnh tranh.
Hãy chọn Zibo Anhao Chemical để có nguồn cung cấp axit oxalic đáng tin cậy và dịch vụ hóa chất trọn gói chuyên nghiệp.
Hãy chọn Zibo Anhao Chemical để có được axit oxalic tinh khiết cao, mang lại hiệu suất ổn định và giá trị cho doanh nghiệp của bạn. Liên hệ với chúng tôi để đặt hàng số lượng lớn hoặc yêu cầu thông số kỹ thuật: info@anhaochemical.com
